2000年，约翰·塞纳参演了自己的首部电影《ReadytoRumble》。2001年，^{自编x6148213}参加了UPN制作的真^{自编x6148214}秀《Manhunt》，并^{自编x6148211}节目中扮演赏金猎^{自编x6148224}团体的首领大蒂姆·金曼（BigTimKingman）。2003年，塞纳亲自演唱了^{自编x6148223}的第五首WWE主题曲《BasicThuganomics》。之后，他又与美国说唱歌手E-40、ChingoBling共同制作了歌曲《HUSTLE》。

2005年，约翰·塞纳发行首张音乐专辑《YouCan’tSeeMe》，这张专辑是与他的表弟ThaTrademarc一起录制的，其中收录了他的入场主题曲《TheTimeisNow》。

2006年10月13日，他凭借电影《海军陆战队员》重返电影界，^{自编x6148221自编x6148216}中饰演一名前海军陆战队员特里顿，这是他第一次以军人的形象^{自编x6148219}现在大荧幕里。2009年，塞纳主演了美国犯罪^{自编x6148226}《12回合》，他在片中饰演警察丹尼•费舍尔。

2014年，约翰·塞纳与说唱歌手WizKhalifa合作为《WWE2K15》电子游戏共同制作了两首配乐单曲《AllDay》《Breaks》。2017年，他为动画电影《费迪南德》中的费迪南德配音。

2018年，约翰·塞纳在《大黄蜂》中担任主角伯恩斯特工，最终他凭借该^{自编x6148210}获得2019年青少年选择奖选择动作电影^{自编x614821b}演员奖的提名。同年，在喜^{自编x6148220}电影《护航父母》中饰演米切尔，并凭借该角色获得2018年美国人民选择奖喜剧电影明星奖。

2021年8月6日，塞纳饰演的电影《X特遣队：全员集结》在美国上映，塞纳饰演克里斯托弗·史密斯一角，并获得2022年评论家选择超级奖电影类超级英雄片最佳^{自编x614822b}演员奖的提名奖。同年，电视剧《和平缔造者》播^{自编x6148229}，塞纳在剧中饰演克里斯托弗·史密斯，塞纳凭借此角色获得包括2023年评论家选择超级奖电影类超级英雄片最佳男演员奖及多项奖项的提名奖。

2023年7月21日，电影《芭比》在美国和中国大陆上映，塞纳在片中饰演美男鱼肯。

2024年5月30日，参演电影《动作明星梦2》上映。8月15日，参演的电影《死亡大乐透》上映。

2025年3月1日，《福布斯》杂志好莱坞片酬榜单出炉，约翰·塞纳片酬为2300万，位列第16。7月2日，出演的电影《国家元首》登陆PrimeVideo。8月21日，主演的电视剧《和平使者第二季》上线MAX。

2026年8月28日，主演的电影《歪心狼对阵Acme》在北美上映。

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